種屬

人

測試酶系

CYP450酶：CYP1A2、2B6、2C8、2C9、2C19、2D6和3A等

UGT酶：UGT1A1、1A3、1A4、1A6、1A9、2B7和2B15等

SULT酶：SULT1A1、1A2、1A3、1B1、1E1和2A1等

CES酶：CES1和CES2

其他：AADAC、FMO等其他酶或亞型可應要求提供

供試品測試濃度

5~7個(gè)，根據已知的藥效和毒性數據設計

探針底物濃度

1個(gè)或1-5個(gè)（直接抑制常數測定），根據探針底物Km值設計

孵育體系蛋白濃度

亞細胞組分：0.1-1 mg/mL（可根據要求提供不同的濃度）

細胞組分：0.1-2×10⁶ cells/mL

基因重組酶體系：250 - 500 pmol/mL 或0.1-1 mg/mL

孵育時(shí)間

直接抑制或TDI IC₅₀ shift：一個(gè)預孵育時(shí)間點(diǎn)，一個(gè)孵育時(shí)間點(diǎn)

TDI KI和Kinact測定：預孵育2-5個(gè)時(shí)間點(diǎn)，一個(gè)正式孵育時(shí)間點(diǎn)

根據不同要求提供

輔酶因子

NADPH或UDPGA（其他輔酶因子可根據要求提供）

分析方法

LC-MS/MS

數據呈現

探針底物代謝產(chǎn)物相對生成量

相對活性（% of NC）

半數抑制濃度（IC₅₀）

抑制活性（%）

IC₅₀偏移

抑制常數（Ki）

最大失活速率常數（Kinact）

導致半數最大失活的游離抑制劑濃度（KI）